免疫学技术篇1

1化学发光免疫分析技术的研究历史背景

免疫分析的发展伴随着抗体制备技术的改进而不断提高。美国科学家Yalow等人首先将标记技术引入免疫分析，他们首先用放射免疫分析法(RIA)进行测定胰岛素。由于这种试验方法限制了试剂的寿命，难以获得长期稳定的检测标准，同时由于存在同位素的使用，不仅会损害操作人员身体健康，也会带来污物处理困难的问题。为了找到更为合理的免疫分析法成为以后20年来研究的热点。直到70年代末，国外有学者将免疫反应与化学发光测定技术相结合，这种集高灵敏度和高特异性的技术称之为化学发光免疫分析法，化学发光免疫技术优势比较明显，主要有以下几点：第一，灵敏度高，检测限范围更精准;第二，自动化程度高，并且没有放射性辐射危害;第三，发光标记物稳定，有效期长，同时应用范围宽，对于分子大小不同的抗原、半抗原及抗体都可检测。因此，化学发光免疫分析在临床、卫生、食品、环保和军事等领域正被越来越多地用于激素、蛋白质、肿瘤、毒物、病毒等成分检测。

2免疫分析基本原理

由免疫反应系统和化学发光分析系统两个关键部分组成了化学发光免疫分析的基本原理，化学发光分析系统主要氧化以及催化的作用于化学发光物质，产生一个激发态的中间体，在处于稳定状态时，发射出光子，然后通过测量仪器测量光量子。通过标记物与发光强度的关系，进而测出被测物质含量。而免疫反应系统是将发光物质在抗原或抗体上直接标记。

3化学免疫分析分类

化学发光免疫分析法主要以标记法的不同来进行分类，目前习惯上将免疫分析法主要分为两类，第一主要是标记免疫分析法，其次是酶免疫分析法，前者是以化学发光标记，后者是以酶标记，以化学发光底物作为信号试剂来进行发光，其原理是不相同的。除此之外，包括荧光免疫分析法以及电化学发光免疫分析法也是目前存在的化学免疫法分析方法。

3.1化学发光标记免疫分析

将化学发光剂如吖啶酯类化合物，直接标记在抗原上或抗体上，其基本原理是启动发光剂发光，快速闪烁。这种标记物其化学反应简单、快速、无须催化剂;夹心法用于大分子抗原，竞争法主要用于检测小分子抗原，另外本底低，非特异性结合相对较少光量不会因为分子大小而受影响，因此能增加灵敏度，一般常用的化学发光物质主要是通过启动发光试剂NaOH-H2O2作用而发光，其发光非常迅速，小分子物质多采用竞争法，夹心法主要用于大分子物质。

3.2化学发光酶免疫分析

通过酶标记生物活性物质，再作用于发光底物，在信号剂的作用下发光，然后用发光测定仪进行测定。化学发光酶免疫分析酶反应的底物是发光剂，按照标记免疫分析，应属酶免疫分析，其操作步骤与酶免分析完全相同。目前常用的标记酶为碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶，它们有各自的发光底物。化学发光酶免疫分析法种类大致有三种，首先是HRP标记CLEIA，一般常用3-氨基邻苯二甲酰肼作为底物，也即是鲁米诺或者用其衍生物4-氨基邻苯二甲酰肼也是可以的，这两种都是重要的发光试剂。需要注意的是该底物需要在碱性缓冲溶液中进行氧化反应，生成激发态中间体，当然这需要在过氧化物酶及活性氧存在的条件下进行，中间体回到基态时就可以发光，此时的波长一般在425nm。曾经先前有人用该标记底物标记抗原或抗体，但后来发现其发光强度多受灵敏度的影响。目前用过氧化物酶进行标记，其发光强度主要依赖酶免疫反应中的酶的浓度大小;其次增强发光酶免疫分析也是化学发光酶免疫分析的一种，它主要是在将增强的发光剂加入到发光系统中，加强发光的信号强度，并且能够保持长时间的稳定性，在一定程度上提高了该分析方法的准确性和灵敏度，便于多次测定。目前在一些现代化的设备上，还可以由计算机进行精确控制操作，比如，往系统中加入发光试剂以及混合、温育、洗涤等，甚至后期的数据处理，进而绘制标准曲线，最终完成患者血清样品的分析并打印出结果;最后一种就是用ALP标记的CLEIA，这种分析方法一般多用环-1，22-二氧乙烷衍生物作为发光底物，它的发光原理主要是其用化学发光酶免疫分析底物而设计的分子结构稳固，其中的芳香基作为发光基团和酶作用，在发光试剂的作用下发光，该底物在碱性磷酸酶的作用下，磷酸酯基发生水解而脱去一个磷酸基，就会产生一个稳定的中间体，然后中间体发生裂解会产生金刚烷酮和激发态的物质，这种常见底物是AMPPD，其作为磷酸酯酶的直接化学发光底物，多用来检测碱性磷酸酯酶和一些配基的结合物。

4应用

4.1激素、蛋白质和肿瘤检测

该系统使反应物形成均相混悬液，顺磁微粒作为固定相，增大反应面积，加速免疫反应，快速分离，自动洗涤，减少酶和催化剂的使用，pH调整即可，避免了许多影响因素，广泛应用于甲状腺功能、药物检测、肿瘤标志物及心血管等项目。

4.2病毒、毒物检测

杨秀岑等用ABEI标记兔抗大肠杆菌lgG，试样温育、离心、沉淀峰值用luminol-H2O2-NaOH发光体系测定;章竹君等测定了粪样中的轮状病毒以HRP酶标记;为研究TNT对人体的毒害作用提供方法，张丽民等以HRP标记免疫测定了血清中4-氨基-2，6-二硝基甲苯，效果非常显著。

4.3其他方面的应用

被越来越多地用于免疫测定中的HRP酶标记生成核酸探针，主要采用两种形式，一种是靶DNA杂交，将HRP直接标记在探针上，同时增强的鲁米诺试剂检测加入分离后的杂交体。另外一种是将DNA探针标记在生物素及地高辛上，然后与靶DNA杂交，再用HRP标记的亲和素和抗地高辛与分离后的杂交体结合，最后加入鲁米诺试剂氧化发光。

免疫学技术篇2

【摘要】目的探讨是否应建立儿童自己的电化学发光免疫技术测定肌酸激酶同工酶(cK-MB)浓度参考值。方法对入院儿童应用电化学发光免疫技术测定血清CK-MB浓度,以目前未区分成人与儿童的参考值判别阴阳性。结果总阳性率太高、女阳性率较男高。结论儿童应建立自己的电化学发光免疫技术测定CK-MB浓度参考值。

【关键词】儿童;肌酸激酶同工酶;参考值;电化学发光免疫技术

血清CK-MB浓度的测定手段方面,电化学发光免疫技术质量测定方法正逐步取代目前仍广为应用的免疫抑制法。目前电化学发光免疫技术质量测定方法测定血清CK―MB的参考值未区分成人与儿童,工作中发现利用该参考值儿童CK-MB的假阳性率太高。现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料对2009年2月5日至6月5日期间入住本院14岁以下的356例患者。男148例,女208例,性别统计均无显著差异。3岁以内278例,3～7岁70例,7～14岁8例。入院诊断呼吸系统感染性疾病167例,腹泻病169例,小儿病毒性心肌炎4例[1],先天性心脏病9例.过敏性紫癜3例,肾炎4例。

1.2方法入院时采集血清标本约2.0毫升,以电化学发光免疫分析技术全自动免疫分析仪测定血清CK-MB浓度。采用罗氏公式生产的Elecsys2010及其配套试剂。参考值为罗氏公式提供,无儿童专用标准,男小于4.49ng/m1,女小于2.88ng/ml。

1.3统计学处理SPSSl7软件统计分析,性别阳性率分析用卡方检验。

2结果

参考罗氏公式提供参考值,阳性189例,总阳性率为57.3%;女阳性率68.27%,男阳性率41.9%,女、男阳性率差异具有非常显著的统计学意义(x2=24.59,P

3讨论

自从通过查血清CK-MB浓度来了解临床一些疾病对心肌有无损害、有无原发性心肌疾病广为应用以来,儿科临床工作中测定CK-MB广为采用未区分成人与儿童的参考值。临床上经常见到被诊断为心肌受损、原发性心肌疾病的患者,患者虽无临床症状及体征却给予长时间营养心肌等治疗,患者和家属背上沉重的经济、思想包袱。本研究发现在应用电化学发光免疫技术测定血清CK-MB利用未区分成人与儿童的参考值时,儿童CK-MB的总阳性率太高,且女的阳性率比男高,但患者临床上并无与心脏疾病相关的症状和体征,出现结果与临床不相吻合的现象。本研究中引用的未区分成人与儿童CK-MB参考值和儿童自己的参考值相比是否因值低而造成本研究中过高的阳性率?女的参考值明显比男低其和本研究中发现女CK-MB阳性率比男高是否具有某种联系?目前已有应用免疫抑制法测定血清CK-MB研究提示早产儿生后24～48小时血清CK-MB活性远高于未区分成人与儿童的CK-MB活性水[2];O～12岁以下CK-MB浓度较13岁以上CK-MB浓度高[3]。本研究和以上研究提示儿童血清CK-MB的参考值不能采用未区分成人与儿童的CK-MB标准。然而目前儿科界尚无儿童自己的CK-MB参考值,其对目前临床上儿童心肌受损、原发性心肌疾病的大量误诊、误治应该负有一定的责任。

目前临床上查血清CK-MB浓度广泛应用的方法为免疫抑制法。但该方法对CK-BB、CK-MM有交叉反应,故该方法特异性差。电化学发光免疫技术测定血清CK-MB的新方法以抗CK_MB特异性抗体来测定血清中CK一MB的浓度,具有高灵敏度、高特异性。故电化学发光免疫技术测定血清CK-MB的新方法极有可能取代目前正广为应用的传统免疫抑制法。让人优虑的是目前我国尚无电化学发光免疫技术查儿童血清CK-MB的参考值。尽快建立电化学发光免疫技术查儿童血清CK-MB的参考值极为迫切,其可以降低儿童CK-MB检验过程中过高的假阳性率,降低心肌受损、原发性心肌疾病的误诊、误治率。减少因误诊、误治造成的不应有的医药资源浪费,降低药源性肌体伤害性疾病的发生,降低患者因对心脏疾病的担忧而产生的恐慌心理及精神负担。

【参考文献】

[1]吴铁吉.小儿病毒性心肌炎诊断标准[J].中华儿科杂志,2000,38(2):75-76.

免疫学技术篇3

【摘要】目的,探讨液基细胞学薄层涂片技术在体液免疫组化中的应用。方法对经巴氏涂片检查发现癌细胞的胸腹水36例分别采用液基细胞学涂片技术和传统涂片方法涂片，然后进行免疫组织化学检查。结果,采用液基细胞学薄层涂片技术制作36片，优质片36片，其优片率100%；采用传统涂片方法制片36片，优质片30例，其优片率83.3%，两者间差异显著。结合免疫组化结果有助于诊断和鉴别诊断间皮瘤和腺癌，结论,采用液基薄层细胞学涂片技术制片提高了制片的质量，对间皮瘤和腺癌的诊断和鉴别诊断提供了有效的方法，提高了脱落细胞学对间皮瘤和腺癌的诊断价值。

【关键词】活组织检查；细胞学技术；免疫组织化学；间皮瘤/诊断；腺癌/诊断

在体液细胞学检查与诊断研究中，涂片及染色质量的好坏直接影响到病理诊断及研究结果的正确判断，而免疫组化结果有助于诊断和鉴别诊断间皮瘤和腺癌。传统的巴氏涂片在免疫组化质量上不能令人满意，如细胞重叠，色调不正、杂质多等，而我科在工作中经过不断的摸索，发现了液基细胞学薄层涂片技术应用于免疫组化中，获得了较满意的效果。

1、材料与方法

1.1材料来源：我科2010—2011年间以经巴氏涂片检查发现癌细胞的胸腹水36例，其中男20例，女16例，年龄35～80岁。所有病例都有手术标本的组织学对照，排除了肿瘤者为阴性病例。

1.2方法：新鲜胸、腹水250～500ml，留置时间复季＜2h，冬季＜4h。

1.2.1胸、腹水沉淀与固定将胸、腹水置于2个50ml的离心管中，每管50ml，2000～2500r/min离心10min，弃上清液，吸出部分沉积物常规涂片，剩余沉积物稀释后直接加入装有低浓度乙醇细胞保存液的保存瓶内备用，在保存瓶内至少放置15min以上。然后经thinprep-2000系统进行电脑程序化处理，制成直往为13mm的薄层细胞涂片（制作免疫组化涂片时，液基薄层制片机的染料临时用95%的无水乙醇代替），自然干片后，按常规免疫组织化学染色，封片、读片诊断。

1.2.2免疫组化用ElivisionTMPlus法。抗体有CEA、Calretinin、Cytokeratin5/6、CD68，均购自福州迈新生物技术开发有限公司。

2、结果

采用液基细胞学薄层涂片技术制片36片，优质片36片，其优片率100%；采用传统涂片方法制片36例，优质片30例，其优片率83.3%，两者间差异显著。

3、讨论

液基细胞学检测是90年展起来的一项制片新技术，已成功的应用于妇科细胞学，并取得了成熟的经验。目前已经广泛用于宫颈癌的筛查，但在体液免疫组化中应用甚少。胸腹腔积液在常规细胞学检查中仍然是目前临床常用的诊断方法之一，传统的巴氏涂片法在体液的肿瘤细胞筛查上应用已超过半个世纪，但容易出现漏诊或误诊，主要原因是其标本的制作往往受到体腔积液的新鲜程度、细胞数量、退变程度、血细胞含量或炎细胞干扰、黏液过多涂片厚薄，固定状态等多方面因素的影响，造成涂片质量差，导致较高比例的假阴性率，假阳性率出现或干扰因素多导致免疫组化结果无法准确判读［1]，有作者认为背景中血细胞的多少与涂片质量有明显的关系，血细胞越多，往往有核细胞成分则少见，癌细胞也稀少，单个存在或不典型［2]。本文选用的液基细胞学薄层涂片技术对标本采集，制片技术及程序比传统涂片具有以下优点［3]：（1）通过离心，细胞均匀涂布形成一个直径13mm的细胞薄层，结构清晰，背景干净，改变手工涂片细胞拥挤、重叠，形态特点不易观察的缺点；（2）避免了细胞过度干燥造成的假象；（3）可以同时处理1～48份标本，并在全自动制片过程中同时完成细胞染色，也减少技术员对标本的接触。

传统的制片方法是将体腔积液离心后直接涂在普通的玻片上。这种涂片质量常不稳定，涂片厚薄不均匀，细胞重叠较重，而背景中又有较多的蛋白黏液，红细胞和各类炎细胞及间皮细胞相混杂在一起，影响细胞的观察，有些异常细胞甚至被遮盖，这些都容易影响诊断的准确性［4]。而液基细胞学薄层涂片几乎保留了离心后的所有细胞,并均匀分布于玻片上，去除了黏液、红细胞、炎细胞的干扰，肿瘤细胞形态保存完整、细胞核、核质、核仁更清楚，获得了三维立体结构。此外，标本储存在保存液中，可重复制片，抗原性不受影响，也可用来作特殊染色，采用液基薄层细胞学涂片技术制片提高了制片的质量，对腺癌和间皮瘤的诊断和鉴别诊断提供了有效的方法，提高了脱落细胞学对腺癌和间皮瘤的诊断价值,与传统制片方法相比，液基细胞学薄层涂片用于免疫组化中还节约抗体量，从而节约成本,值得推广应用［5]。

参考文献

［1]梁昌杰，吴秋良，梁小曼等.胸水涂片肿瘤细胞学诊断.广东医学，2001，22（11）：1046.

［2]杨霞，姚宇琪，王娟.液基细胞学（LPT）在体腔积液检查诊断中的应用［J]，中国实验诊断学，2009，13（2）：194-196.

［3]谢寿城，液基细胞学薄层涂片技术对宫颈疾病诊断中的应用价值［J]，中国实用医药，2010，1（5）：31—32.

［4]董卫彤，覃志坚，潘兴寿等，胸腹水细胞学与组织学制片的免疫细胞化学诊断对比研究［J]，江西医学检验，2006，24（1）：17—18.

免疫学技术篇4

关键词：现代免疫分析技术;食品卫生检验;应用

食品卫生检验是保证食品安全的重要环节，现阶段，食品呈现多样化发展，加强对食品卫生检验技术的研究具有十分现实的意义。现代免疫分析技术概述

标记免疫分析技术就是用抗原体间特异反应为基础，结合各项定量分析信号对某种物质进行定量或定性测定的一种技术，具有高特异性、强灵敏度等特点，被广泛的应用于基础医学以及临床中，并发挥了重要的作用。这种免疫分析技术的基本原理大致相同，根据标记物种类的不同，检验发出的信号也不同。目前这类检测方法有很多种，目前得到广泛应用于推广的主要包括以下几种。

放射免疫分析：简称RIA，这种分析技术是将特异性免疫化学技术与放射性核素示踪法相结合的技术，能够对一切活性物质进行测定。根据反应试剂以及操作步骤的不同，可以将其分为双抗体夹心法、经典RIA法、生物素法、双位点法、间接法。

荧光免疫分析技术：简称FIA。这种分析技术的原理就是将荧光素与抗原或抗体进行结合，在荧光显微镜下，标记的抗原或抗体就会发生荧光特异免疫现象。这种分析技术除了传统的标记分析功能外，还具有一定的定位功能。

酶免疫检测技术：简称EIA。这种分析技术是一种非放射性标记分析技术，将酶反应以及免疫反应的特点有机的结合起来，实现了高效与专一的叠加。根据应用目的的不同，可以将酶免疫分析技术分为非均相酶免疫检测以及均相酶免疫检测两种，其中非均相检测又可以分为液相与固相两种。

发光免疫分析：简称CLIA。这种分析技术是在免疫反应与发光反应的基础上建立起来的，结合了发光反应的灵敏度以及抗原反应的特异性。根据分析的方式不同，能够将其分为化学、化学发光酶、生物这三种免疫分析法。

免疫电镜分析：简称IEM。这种技术也成为免疫细胞化学技术，主要是用用显微镜等装置，对抗原、抗体等反应进行定位观察与分析。这种分析技术与定量分析有很大的区别，同时具有分子级别的定位功能。

胶体金免疫标记分析：简称CGIA。这种技术就是在电镜、光镜下对抗体或抗原进行定位、定量分析，广泛的应用于生物或医学领域，并且使用相对简单，适合于家庭、个人使用。酶免疫分析技术在食品卫生检验中的应用

食品卫生问题是眼下社会广泛关注的焦点问题之一，与人们的生活息息相关。现代免疫分析技术中，重点介绍酶免疫分析技术在食品卫生检验中的应用。

2.1酶免疫分析技术优点

酶免疫分析技术在食品卫生检验中具有以下几个方面的优势：（1）具有较高的灵敏度，能够检测出待测液中的微量抗原与抗体，并与之结合发生快速的催化反应;（2）酶免疫分析技术具有抗干扰能力强的优点，能够避免荧光物质、有色物质、结构类物质等对检测物品的干扰。特别是对于食品来说，需要保证检验后的食品的有效性，因此该优点使其用于食品卫生检测的重要原因。（3）这种分析方法应用于食品卫生检验中操作步骤较少，降低了食品检验的难度，提高了检验的效率;（4）这种检测分析技术进行食品检验中不需要使用挥发性的有机溶剂，操作十分安全，有效的降低了对环境的污染。（5）酶免疫分析技术对检验场地与设备仪器的要求不高。

2.2食品卫生检验中酶免疫分析技术的具体应用

酶免疫检测分析技术在食品卫生检验中，具体应用在以下几个方面：

对食品送农药残留的检验：由于在食品形成的环节中，农药大量的使用，造成农药残留问题在食品卫生中日渐突出，主要的农药种类包括杀虫剂以及除草剂两种。随着科技的发展，酶免疫技术得到了长足的发展，越来越多的农药建立了酶联免疫吸附检测方法。其中在除草剂农药方面，有有机磷的杀螟松，甲氟磷酸异己酶;属有机氯的2，4一D，草不绿、DDT等，杀虫剂方面如除虫菊酯、多菌是、克菌丹、西玛津均有酶联免疫方法的报道.有的已有商品化的测试盒供应。

对食品中生物碱、毒素等的检验：针对可卡因、海洛因、吗啡等，建立了酶联免疫吸附检验方法，国内一些地区甚至存在用于检测吗啡的胶体金试纸。一些饭店为了招揽更多的顾客，甚至在食品中加入罂粟壳，其中以火锅、汤料等为主，公安部以及相关部门建立了针对性的酶联免疫吸附检测方法，也研制出了具体的检验试纸，检验试纸的商品化也即将面世。

对食品中激素、抗生素等残留的检验：一些肉质品、奶制品中由于饲养过程中饲料中添加剂或直接有添加剂加入成品，导致食品中存在激素以及抗生素残留，对食品卫生造成很大的危害。对此，我国相继建立了针对性的酶联免疫吸附检验方法。

另外，酶联免疫吸附检测法还用于对食品中一些毒素的检验，包括动物毒素（海豚毒素等）、藻类毒素、贝类毒素等。总结

食品安全问题一直是社会关注的焦点问题，三聚氰胺、苏丹红、瘦肉精等食品安全事件使得人们对食品卫生的关注程度进一步升级。免疫分析技术在食品卫生检验中的应用，能够快速有效的对食品进行安全检验，得出定量的检测结果，确保食品的安全，为人们创造一个安全放心的食品卫生环境。

参考文献：

[1]陈茂林，蔡健荣，赵晓莲，司鸿飞.标记免疫分析技术在食品分析中的应用[J].中国卫生检验杂志.2012，25（7）：124-125.

免疫学技术篇5

关键词免疫分析药物安全检测技术传统方法新型方法

药物安全问题是关乎人类身体健康重大问题，化学危害中农药残留是影响我国药物安全的重要因素之一。控制农产品中农药残留的关键就是对农产品中农药残留量及时、准确的分析检测，以监控农药的合理使用，防止农药残留超标的产品上市。因此，研究建立新型、快速、高效、灵敏的检测方法是及时发现和防范药物安全问题的必然要求。

免疫检测技术是将免疫反应和现代测试手段相结合而建立的超微量测定技术。免疫分析法就是基于抗原、抗体的特异性识别和结合反应为基础的分析方法，它具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、分析容量大、检测成本低、安全可靠等优点［1］。目前，应用到药物安全检测领域的免疫分析方法包括有传统的放射免疫分析、酶联免疫分析、荧光免疫分析、发光免疫分析、免疫传感器技术外，还出现了新型的免疫分析方法如分子印迹技术、流动注射免疫分析、免疫-PCR技术及多组分免疫分析等新方法。免疫分析技术以其独特的优势处于药物安全检测的前沿，通过查阅相关国内外文献，本文从传统和新型免疫分析技术出发，综述了免疫分析在药物安全中的应用现状。

新型免疫分析法

分子印迹技术：分子印迹技术利用化学手段合成一种高分子聚合物-分子印迹聚合物（MIP），MIP能够特异性吸附作为印迹分子的待测物，在免疫分析中可以取代生物抗体，被科学家誉为“人工抗体”。它有一定的预定性，识别性和实用性特点。近年来，固相萃取（SPE）已成为痕量分析的常用富集技术。免疫亲和柱以抗体为亲和配体能够特异性地捕获相应的农兽药小分子物质，有较好的特异性富集痕量残留的农兽药。但作为生物抗体，获得的周期长，免疫亲和柱造价相对较高且由于对环境的敏感性，其储存和反应条件较为苛刻。与生物抗体比较，MIP有稳定性好、制备周期短、费用低、易于保存和可在粗糙环境中应用等优势。作为一种新型固相萃取填料，MIPs较高的选择性和对目标分子的富集能力，可以大大提高SPE用于痕量分析的准确性，降低检测限，用于替代免疫亲和柱。MIPs的固相萃取（MISPE）技术已被广泛应用于药物、生物、药物、环境样品分析，作为监测药物、生物大分子、烟碱、除草剂、农药等的预富集处理［2～5］。2006年英国Israel等研究了以氨基甲酸甲酯为印迹分子，合成的印迹物制成固相萃取柱，用来富集加标河水中氨基甲酸甲酯。结果表明即使有浓度极高的结构类似物呋喃丹，苯恶威等干扰物存在，检测限能达到1μg/L。Immer等利用分子印迹聚合物固相萃取水样和土壤中氯三嗪农药，回收率80%，最低检测量0.05～0.2μg/L。

流动注射免疫分析：为提高免疫分析的分析速度和自动化程度，自80年代中期以来，国外出现了流动注射免疫分析法（flow-injectionimmunoassay，FIIA）。FIIA综合了两者的特点且可以计算机控制缓冲液的流速、自动进样、检测器的检测及数据处理的优点，在临床生物样品的检测、低分子药物浓度的临床监测及环境污染物的含量测定等方面具较广的应用前景［6］。该分析方法具有分析时间短、需样品量小和操作简便等特点。

免疫-PCR技术：免疫PCR方法（immuno-PCR）是SanoT，SmithCL和CantorCR等于1992年将免疫学反应和PCR技术相结合而创建的一种新的检测技术，同时具有抗原-抗体反应的特异性和PCR扩增技术的高效性。它运用PCR强大的扩增能力来放大抗原-抗体特异性反应的信号，使实验中只需数百个抗原分子即可检测，甚至在理论上可检测到1至数个抗原分子。敏感性比现行的ELISA法高102～108倍。目前主要用于检测肿瘤标志物、细胞因子、神经内分泌活性多肽、病毒抗原、细菌、酶、支原体、衣原体等微量抗原。

毛细管电泳免疫分析技术：毛细管电泳免疫分析技术是将毛细管电泳技术（CE）与免疫分析技术（IA）相结合起来的一种新型的免疫分析技术。毛细管电泳免疫分析分为竞争性毛细管电泳免疫分析和非竞争性毛细管电泳免疫分析。毛细管电泳免疫分析的检测器主要有激光诱导荧光和紫外检测器。

多组分免疫分析：多组分免疫分析（MIA）是指在同一份样品中同时测定两种或两种以上的相关分析物的免疫分析技术。这种技术的应用对混配农药接触分析以及对其联合作用及体内代谢动力学的探讨和研究具有重要意义。

由于抗体的特异性，一种抗体一般只能检测一种抗原，当进行多组分分析时，就得同时使用多种抗体。多组分免疫分析技术现在有两种设计方式：①多探针标记法它基于用不同标记物对多种抗原或半抗原标记，用竞争法测定各物质的量；②多组分定位包被空间分辨分析法即利用空间的不同位置标记同种标记物来测定，在不同的固相体系或同一固相载体上的不同反应区带上包被不同抗体，用于固相免疫同时测定［7］。

展望

药物安全问题已成为21世纪消费者面临的首要问题。为了保证药物的安全，就需要有快速、灵敏的检测技术作支撑和保障。目前免疫检测技术以其明显的优势处于检测技术的前沿，将这几种技术运用到药物安全检测中必将提高药物安全检测的有效性和实用性。

参考文献

1邵晓龙,李季.免疫分析技术在环境激素检测中的应用［J］.农业环境与发展,2004,22:44-45.

2房彦军,严守雷,高志贤,等.农药抑芽丹分子印迹聚合物的识别机制与特性［J］.预防医学杂志,2006,24（3）:171-174.

3王金成,徐青,薛兴亚,等.苯基脲类除草剂分子印迹聚合物的合成和识别性能研究［J］.高等学校化学学报,2006,27（7）:1227-1231.

4严守雷,高志贤,房彦军.农药久效磷分子印迹聚合物合成及其亲合性评估［J］.高分子学报,2006,1:160-163.

5LvYongqin,LinZhixing,FengWei,etal.Selectiverecognitionandlargeenrichmentofdimethoatefromtealeavesbymolecularly-imprintedpolymers［J］.BiochemicalEngineeringJournal,2007,36（3）:221-229.

免疫学技术篇6

【关键词】临床医学；免疫检验；历史；解决方法

1引言

伴随着世界经济与学技术的蓬勃发展，医疗技术的发展在现当代取得了一系列举世瞩目的成就，就临床免疫学检验工作而言，已成为现代医院诊疗工中不可或缺的重要组成部分。随着现代医疗诊断技术的不断发展，如何有效地对临床免疫检验的质量进行控制已直接影响到临床的诊断结果的准确性，同时也间接影响到最终地临床治疗效果。由于在整个标本采集的过程中免疫检验标本从采集到结果的检验需经历的环节较多，这就对临床医师对患者的生理、病理情况以及争端方法的熟悉程度及综合技能提出了很高的要求；

2临床免疫学检验的建立与发展

临床医学免疫检验自建立至今已经历了一百个春秋。自从19世纪80年代后期开始，随着很多学者专家开始从免疫动物或者携带有传染病病毒的患者血清中发现有能够治愈患者疾病的特异性结合病原体或其一系列的衍生产物的物质，而这些物质及为我们现在所熟识的抗体。就现代医学理念来讲，将能够引起人体体内产生抗体的物质统称为抗原。正是由于抗原以及抗体的发现，才促使现代医学专家学者开始对人类或动物体外抗原刺激体内反应产生抗体这一现象进行系统深入的研究。随着免疫学理论以及分子生物学还有其它以现代科学技术为依托的新兴临床免疫学检验继能够有日新月异的发展。

3提高临床免疫检验质量的方法

3.1标本采集与设备管理的优化

作为检验分析前对质量控制的要求来说，检验人员首先需要做到对标本的采集和保存工作；密切注意整个样本采集过程中的样本采集的时间、止血带的使用时间和方法、采血的姿势、抗凝剂和稳定剂的选用情况。免疫检验工作，首先要求检验人员注意对整个标本的采集和处理工作。不同的采样试验对所采集的标本的要求有所不同。对于大多数以病人血清为标本的免疫检验而言，采集血清的时间应在清晨被采集者未进食前为宜，保持针筒的干燥性，抽血完成后需要马上除去针头并将所采集到的血液注入到干燥的试管内，注意在整个注血过程中采样人员的注血速度不宜过快，不能对所采样本进行振摇等一系列不允许的动作，以防溶血。在将整个血清分离完成后，应及时送往检测，如需要求对所采试样进行保存的话，可将试样置于冰箱内冷藏，不宜速冻，以防止因为反复冻融而对整个检验结果产生不良的影响。作为对测定的血清标本的收集过程来说，激素类和治疗药物的使用要特别注意收集时间的变化以及检验人员的变化对整个测定结果的影响；其次，在采购人员对于相关仪器设备及试剂的选择方面也同样对整个测量结果有着十分大的影响；作为整个检验的执行者来说仪器设备性能的好坏将直接对检验结果的精确度造成非常大的影响。在整个检测结束后要注意地成套仪器的保养和维护工作，工作人员要经常对温度计、水浴箱、酶标仪、稀释棒、恒温箱、吸量管、分光光度计等临床免疫检验的仪器设备进行核定、校正以及检查等工作，从而确保仪器设备的使用性能，减少实验过程中因为仪器所引起的误差，继而来保证检验结果准确性的目的，最终为意识的治疗及患者的康复提供最有用的保障。对于当今品鱼龙混杂，质量不一的试剂市场来说，慎重选择且经常对试剂性能进行有关试剂的检定工作是保证检验成功的重要因素。

3.2提高技术人员的素质

人是整个免疫检验过程中的主体，是整个免疫检验过程中最积极、表现最为活跃的因素。在免疫检验过程工作的所有环节，都需要靠人来对整个试验进行操作和把握，最终实现对整个临床免疫检验质量控制的目标。因此，在整个临床免疫检测过程中检验技术人员的综合素质与业务能力会对整个免疫检验的质量和结果产生重大的影响。因此，就要求临床免疫检验的工作人员要每天按时对相关检测设备进行消毒、搞好实验室的卫生；做好相关实验仪器的定期检查工作：如冰箱、恒温箱、水浴箱、酶标仪、荧光显微镜等，做好对整个实验仪器的记录使用情况，并如实填写实验报告，按规定进行免疫检验的质控工作，并分析情况做好记录，签字等工作。

4临床免疫学检验与生物技术

以现代新型科学技术为依托的临床医学免疫检验技术的广泛应用，对现代免疫学研究的发展起了非常大的推动作用飞，其结果又在更深的层次以及更为广范的领域内促进了现代高新生物医疗技术产业的发展，能够使诸如细胞工程技术以及基因工程技术为代表的现代高科技技术得到更广泛应用。近年来伴随着疫苗、基因工程抗体治疗以及重组细胞因子研制为主的生物工程制品产业有了蓬勃的发展，极大地推动了现代免疫学防治的开展，对许多传染性疾病的传播起到了强有力的遏制作用，从而为挽救更多的生命做出了巨大的贡献。

5小结

因此，对于整个临床免疫检验的过程而言，对免疫检验做好全面的质量管理是确保整个临床免疫检验结果准确性的重要保证。由于在对免疫检验标本进行采集到对标本进行检验的这个过程需经历很繁琐且比较复杂的一系列环节，因此，就要求临床医师必须要熟悉患者的生理、病理情况，同时，也要求护理人员及检验人员对临床免疫检验的各种影响因素要有全面系统的了解和认识，每一个环节的操作须做到规范化，完全按照标准进行，以确保免疫检验的可靠性和准确性，并提高临床治疗效果。

参考文献

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[2]王建兵，郑松柏，徐建华，黄，庄俊华，梁伟雄.三种临床化学检测项目测量结果准确度验证方法的比较[J].中国现代医学杂志.2009（09）.